凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是与细胞壁结合的凝聚因子,称结合凝固酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使发生沉淀,包围于细菌外面而凝聚成块,玻片法阳性结果是由此凝聚因子所致;另一种凝固酶是分泌至菌体外,称为游离凝固酶,它能使凝血酶原变成凝血酶类产物,使纤维蛋白原变为纤维蛋白,从而使血浆凝固。试管法可同时测定结合型和游离型凝固酶。
体内菌群的种类和比例正常,人体处于动态平衡。
本试验仅用于致病性葡萄球的鉴定。
异常结果: (1) 侵袭性疾病主要引起化脓性炎症。葡萄球菌可通过多种途径侵入机体,导致皮肤或器官的多种感染,甚至败血症。
① 皮肤软组织感染主要有疖、痛、毛囊炎、脓痤疮、甲沟炎、麦粒肿、蜂窝组织炎、伤口化脓等。
② 内脏器官感染如肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等,主要由金葡菌引起。
③ 全身感染如败血症、脓毒血症等,多由金葡菌引起,新生儿或机体防御可能严重受损时表皮葡萄球菌也可引起严重败血症。
(2) 毒性疾病由金葡菌产生的有关外毒素引起
① 食物中毒 进食含肠毒素食物后1-6小时即可出现症状,如恶心、呕吐、腹痛、腹泻,大多数病人于数小时至1日内恢复。
② 烫伤样皮肤综合征多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人,开始有红斑,1-2天有皮起皱,继而形成水疱,至表皮脱落。由表皮溶解毒素引起。
③ 毒性休克综合征 由TSST1引起,主要表现为高热、低血压、红斑皮疹伴脱屑和休克等,半数以上病人有呕、腹泻、肌痛、结膜及粘膜充血,肝肾功能损害等,偶尔有心脏受累的表现。
④ 假膜炎肠炎本质是一种菌群失调性肠炎,病理特点是肠粘膜被一层炎性假膜所覆盖,该假膜由炎性渗出物、肠粘膜坏死块和细菌组成。人群中约10-15%有少量金葡菌寄居于肠道,当优势菌如脆弱类杆菌、大肠肝菌等因抗菌药物的应用而被抑制或杀灭后,耐药的金葡菌就乘机繁殖而产生毒素,引起以腹泻为主的临床症状。
需要检查的人群: 有上述某些临床症状者
注意事项:①玻片法为筛选试验,阳性、阴性均需进行试管法测定。②血浆必须新鲜。③应使用肝素而非枸橼酸盐作抗凝剂抗凝的血浆。④本试验也可用市购的胶乳凝集试验试剂盒测定。
不合宜人群: 没有
检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。
检查时要求:积极配合医生
凝固酶试验
方法: (1) 玻片法:在一张洁净玻片中央加1滴生理盐水,用接种环取待检培养物与其混合(设阳性和阴性对照)制成菌悬液,若经10-20s内无自凝现象发生,则加入人或兔新鲜血浆1环,与菌悬液混合,观察结果。(2) 试管法:于试管内加1:4稀释的兔或人血浆0.5ml,再加1-2个待试菌菌落,置37℃水浴,每30min观察1次结果。
结果:(1) 玻片法:5-10s内出现凝集者为阳性。(2) 试管法:如有凝块或整管凝集出现为阳性。2h后无上述现象出现,则放置过夜后再观察。
新生儿败血症