测定血浆蛋白的水平和分析其成分是肝脏疾病重要试验之一。有关这方面的测定在别外章节中已有详尽讨论,本节中主要叙述一些和蛋白质代谢有关的简单血清胶体稳定试验。各种血清胶体稳定性试验的原理基本相同,但所用的试剂不同,促进和抑制絮浊的作用有差异,目前临床常用的有TTT试验。
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各类血清胶体稳定性试验在不同的肝病或同一疾病的不同时期,其阳性率可有差异,各有其一定临床意义。
(1) 急性肝炎的诊断:在急性肝炎和急性肝损害时,各类血清絮状、浊度试验均可出现阳性,总阳性率约80%-90%。TTT于发病一周开始升高,二周时达高峰,以后逐渐降至正常。这些改变可在黄疸前期即出现,故对急性肝炎有早期诊断意义,但不如转氨酶敏感,阳性率也比转氨酶低。出现阳性时期较转氨酶为迟,这是因为蛋白质的更新须有一定时间,如白蛋白的半寿期10-36天,因此肝脏疾病引起的蛋白质的变化常需一定时间才能表现出来。在无黄疸型肝炎病例,血清胶体稳定性试验常可作为诊断的敏感指标。如急性肝炎絮浊试验持续阳性,提示肝病有转入慢性化的趋势。
(2) 肝炎与肝硬化病情的判断:在急性肝炎时,TTT的变化和血清脂质升降相平行,但随着病变的迁延化、慢性化、则与血清γ球蛋白呈正相关,故TTT持续阳性是肝病迁延化、慢性化的反映。
(3) 阻塞性黄疸与肝炎的鉴别:当阻塞性黄疸患者尚无肝细胞损害时,各类血清絮浊试验多属阴性,与急性肝实质损害时不同,对于鉴别黄疸类型有一定价值。但在长期阻塞性黄疸或合并感染的病人,肝实质亦常有损害,此试验亦能呈阳性,但一般见于病程中、后期。在长期黄疸病例,如血清絮浊试验持续阴性,应考虑先天性黄疸的可能。
(4) 严重妊娠恶阻与妊娠合并肝炎的鉴别:妊娠恶阻时可出现中度的高胆红素血症和转氨酶升高,但血清絮浊试验几乎全都正常;相反,妊娠合并肝炎时则在90%以上病例血清絮浊试验均呈阳性反应。
(5) 脂肪肝时,TTT常升高。有人测定TTT/ZnTT比值,发现在脂肪肝时较慢性肝炎为高,认为可借此比值变化作为两者鉴别诊断的参考。在转移性肝癌时,TTT值较原发性肝癌时为低,因此对肝癌病例,此试验呈低值者宜先考虑转移性肝癌,呈高值者优先考虑原发性肝癌,但这仅有参考价值,主要还应根据临床。在血吸虫性肝硬变时,血清絮浊试验常可阳性。
(6) 肝外疾病:血清胶体稳定性试验对肝病并不具有特异性,在其他可发生白蛋白减少、球蛋白(γ或β球蛋白)或类脂质增加的疾病如疟疾、结缔组织疾病、黑热病、亚急性细菌性心内膜炎、多发性骨髓瘤等疾患时,亦可呈阳性反应。
TTT是一个很简单的试验,但各试验室间出入往往不小。造成此差异因素很多;首先是虽然同称为TTT试验,但各个实验室在试剂配制,标准曲线绘制或标准管配制方法上并不相同。
(1) 国内所报告的TTT单位为Shank(襄克)单位。1944年Maclagen(麦克莱根)首先建立TTT试验,当时以Kingsley(金斯莱)尿蛋白比浊管表示TTT浊度单位(相当于10mg/dl尿蛋白溶液加磺柳酸所显示的浊度为一个Maclagan单位)。后来,Shank和Hoagland改用BaSO4悬液作为浊度标准,由0.0962mol/L BaCl2加H2SO4所产生的浊度相当于Maclagan所应用的Kingsley标准。但在发表文章
时,误印为0.0962N BaCl2,因此测定结果为麦氏单位的二倍(1个麦氏单位=2个Shank单位)。
(2) 血清要新鲜,应早晨空腹抽血。用分光光度计比浊法测定麝浊时,如血内脂质较多,可用生理盐水6ml代替缓冲液稀释血清,作空白管。
(3) 麝香草酚-巴比妥缓冲液的pH应在7.50-7.60。pH增高,敏感度降低,可出现假阴性;pH降低,敏感度升高,可出现假阳性。
(4) 为了简化手续,不少实验室用100g/L麝香草酚乙醇溶液,直接加入巴比妥缓冲液中,省去结晶和过滤步骤,但此配方较原法多含1%乙醇,试验结果表明比原配方的浊度偏离约20%,絮状试验阳性率反而降低。
(5) 麝香草酚浊度试验结果随温度的改变而有所变化。一般是温度高,浊度低;温度低,浊度高。为了克服这一误差,可以从表1上将不同温度下的浊度结果换算成25℃的结果以便于比较。
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