血液及骨髓标本的细菌学检验是对血液及骨髓标本进行氧化酶试验、触酶试验和硝酸盐还原试验等等进行判断出标本中所含的细菌类型与种类。
各种致病性细菌检验呈阴性。
对细菌菌落涂片、革兰染色,观察细菌形态及染色性,如为革兰阴性杆菌,进行氧化酶试验、触酶试验和硝酸盐还原试验,氧化酶阴性、触酶试验和硝酸盐还原试验阳性者初步判断为肠杆菌科细菌,接种KIA、MIU培养基。KIA、MIU培养基上的生化结果符合沙门菌属者,用沙门菌属诊断血清做玻片凝集后确认血清型;KIA、MIU培养基上的生化结果符合肠杆菌科其他菌属,血液中常见革兰阴性杆菌的初步鉴定等等。
异常结果:
出现菌血症症状 :
(1)骤起高热,可到40-41度,或低温,起病急,病情重,发展迅速;
(2)头痛、头晕,恶心,呕吐,可有意识障碍;
(3)心率加快、脉搏细速,呼吸急促或困难;
(4)肝脾可肿大,重者可黄疸,皮下出血斑等。
需要检查的人群:黄疸,皮下出血斑,头晕,恶心,呕吐,高热等疑似 菌血症 症状者
(1)一般应在抗菌药物使用前采集血液标本,如果患者已用过抗菌药物或情况不明时,应使用硫酸镁肉汤增菌液,以中和四环素、链霉素、新霉素、多粘菌素等抗生素,并添加抗菌物质拮抗剂如5%对氨基苯甲酸(PABA)拮抗磺胺类、100IU/50ml青霉素酶破坏青霉素和加入0.03%-0.05 9/6聚茴香脑磺酸钠(SPS)灭活氨基糖苷类及多肽类抗生素。
(2)对疑为波浪热、亚急性细菌性心内膜炎的患者,培养瓶应孵育至第四周,盲目翻种后无菌生长,方可报告阴性。
(3)为了尽快发现病原菌,在7天的孵育期内应至少盲目翻种2次,第一次在标本孵育12-18h后。在以后的孵育期中应每天观察瓶内的变化,如有细菌生长现象,需及时接种和涂片染色观察报告。7天孵育后仍无细菌生长迹象,进行盲目接种。每次接种需氧培养均需接种羊血平板和巧克力琼脂平板、厌氧培养接种厌氧血琼脂平板和羊血琼脂平板,分别进行需氧和厌氧培养。
(4)血液细菌学培养是诊断菌血症和败血症的病原学依据。常见的病原菌见表5—2。在同一患者的2份血液标本中检出同一细菌或检出细菌的患者2-3周后血清中的相应抗体升高则可作出肯定的病原学结论。一般菌血症由一种细菌引起,但也有同时两种细菌的混合感染、两种细菌或细菌和真菌的先后交替感染情况,有时也会出现不常见的细菌,这些情况不能随意判定为污染菌。
(5)采血次数及间隔在脑膜炎、细菌性肺炎等需马上开始抗菌治疗的急性发热性疾病、或急性骨髓炎、化脓性关节炎等需紧急手术的患者,应立即从两臂分别取2份标本做血液细菌培养。对心内膜炎患者,在24h内采血3次,每次间隔不少于30min,必要时次日再采血2次。对不明原因发热者2次抽血间隔60min,必要时于24-48h后再抽血2次。因为1次血培养不足以说明问题,且会遗漏阳性结果。
标本采集怀疑为菌血症的患者,一般应在发病初期采集,或在体温上升期采取;原则上应在抗生素使用前采取,对已开始抗生素治疗的患者可在下次给药前采取;大多由肘静脉采取,对亚急性细菌性心内膜炎的患者采集股动脉血,也可在靠近感染病灶的部位采集。采血部位先用碘酒消毒,然后用75%酒精脱碘。成人采血量每次5-10ml,儿童1-2ml,分别注入硫酸镁葡萄糖肉汤(需氧培养)和硫乙醇酸钠肉汤(厌氧培养)培养瓶中,疑为沙门菌引起的肠热症可注入胆汁葡萄糖肉汤,轻轻摇动混匀。血液与培养基的比例应为1:10,可使血液中的抗菌物质如原有抗生素、溶菌酶、抗体和补体等充分稀释,不能发挥抗菌活性。
小儿血管角质瘤综合征,非洲锥虫病,小儿家族性非溶血性黄疸综合征,无胆色素尿性黄疸综合征,杜波组织胞浆菌病