核抗原有3个组成部分:组蛋白、DNA、可溶性核抗原,后者因可溶于磷酸盐缓冲液(或生理盐水)中。故名可提取的核抗原(extractable nuclear antigen,ENA)。从分子水平识别ENA多肽抗体足20世纪80年代抗核抗体研究的重大进展,现已发现这类抗体有10余种,抗ENA抗体为其总称。
正常人血清抗ENA抗体均为阴性。
抗Sm抗体和抗dsDNA一样,对SLE有高度特异性,且不论是否活动期,抗Sm均可阳性,可作为SLE的标志性抗体。但SLE患者中抗Sm阳性者仅占30%左右(20%-40%),故抗Sm阴性时不能排除SLE诊断,抗Sm抗体与临床症状和疾病转归之间的关系迄今尚无一致意见。抗U1-RNP自身抗体在多种风湿病患者血中均可检出,SLE患者的阳性率30%-50%;全身性进行性硬化症(PSS)25%-30%;皮肌炎10%-20%,类风湿性关节炎5%-10%,而在混合性结缔组织病(MCTD)患者,高滴度的抗U1-RNP抗体检出率可达100%,这些患者常无其他特异性的自身抗体。因此,高滴度的抗U1-RNP(尤其是高滴度的抗70kD)抗体被认为是MCTD的诊断标志。抗U1-RNP抗体(抗70kD)阳性与肌炎、食管运动功能障碍、雷诺现象相关,但阳性患者多不发生肾炎。抗SS-A/Ro抗体与几种自身免疫病相关。最常见于干燥综合征(40%-95%的病例),也见于系统性红斑狼疮(20%-60%)及原发性胆汁性肝硬化(20%),偶见于慢性活动性肝炎。抗SS-B/La抗体几乎仅见于女性患者(29∶1),可出现在干燥综合征(40%-95%的患者)及系统性红斑狼疮(10%-20%)患者。在干燥综合征者中,抗SS-A/Ro抗体和抗SS-B/La抗体几乎总是同时出现。因此抗SS-A和抗SS-B又被认为是干燥综合征的标志性抗体。抗Scl-70抗体主要见于全身性进行性硬化症(PSS)中的弥漫型。是该病的标志性抗体,其阳性率25%-70%,在重型弥漫型硬皮病患者可高达75%,在CREST综合征患者抗Scl-70检出率仅4%-11%,此抗体阳性者抗着丝粒抗体多为阴性。局限型硬皮病患者,此抗体检出率很低,仅约20%。抗Jo-1对多发性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)有一定价值;抗核糖体(Rib)抗体主要出现于SLE,有人认为也可作为SLE标志抗体,为狼疮活动的指标。
(1)在用对流免疫电泳法检测时,待测血清如含抗U1-RNP和抗Sm两种抗体,与ENA孔之间可出现两条沉淀线。靠近阴极侧的代表抗U1-RNP抗体,靠近阳极侧的代表抗Sm抗体。如只出现一条沉淀线。则需与阳性对照血清参比。以判定其性质。由于Sm抗原可耐56℃ 1h的处理。U1-RNP则否,故也可将ENA抗原加热处理后再与待测血清作对流免疫电泳,即可判定沉淀线性质。也有文献报道,应用核糖核酸酶处理U1-RNP。以区别抗Sm或抗U1-RNP抗体。
(2)免疫印迹法的优点是一次可同时检测7种多肽抗体,但其与对流免疫电泳法或琼脂双向扩散法比较,阳性率并无显著提高(主要原因是其作用的靶抗原多经过热变性处理,使得原先存在于分子表面的抗原表位发生了改变)。因此相应多肽抗体阴性,并不能排除某种风湿病的存在。
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