间接免疫荧光试验是用对应某一种抗原的抗体(这里被称为一抗)与细胞孵育结合,在采用对应一抗(也就是抗一抗)的抗体(这里被称为二抗,二抗上偶联有荧光素分子)与细胞孵育结合后在荧光显微镜下观察。
<1:64
异常结果:
单份血清效价≥1:64或双份血清效价呈4倍增长或有IgM抗体出现即可诊断为立克次体感染。本法不能区分患者感染的立克次体的类型。特异性抗立克次体的IgM抗体的出现提示新近感染。
需要检测的人群:
先天性弓形体感染 地方性斑疹伤寒 寇热 小儿支原体肺炎 布氏菌病等
检查前:
抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食 物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天 的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。
检查时:
应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难
不适宜人群:没有
(1) 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
(2) 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
(3) 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
(4)取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
(5)立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
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