一代二代三代试管婴儿的区别在于技术的不同。一代和二代的区别在于精子和卵子受精方式不一样，一代是精子和卵子自然结合，最终形成胚胎，二代是在医生的帮助下形成胚胎，三代是通过高科技废弃异常的胚胎。
第一代、第二代、第三代之间没有明显的级别高低，分别适合于不同的。第一代是常规试管婴儿，适合于男方精液基本正常或者稍微低一点的夫妇。第二代是卵细胞浆内单精子注射，适合于前次常规受精失败了或者受精率小于30%，第三代植入前的遗传学诊断，适合于有遗传性疾病的，需要选择健康胚胎移植的夫妇，X染色体或者Y染色体一些缺陷的、平衡染色体异常的，这就需要选择第三代。
第一代试管婴儿是将精子与卵子放在一起，用精液直接跟取出的卵子培养，自己结合受精，第二代试管婴儿主要是针对男性原因引起的不孕不育输精管，少弱精问题，就是把精液进行处理，取出比较优质的精子再和卵子去结合。
所谓第一代第二代只是一个通俗的非正规的说法。在常规试管婴儿治疗过程中，患者把获取到的卵子和精子经过一定的处理后放在特定的环境中，在经过一定时间后精子和卵子会自然地结合在一道成为受精卵，过程患者俗称为第一代试管婴儿。但如果精子质量或数量异常，在经过一定时间后精子和卵子则不会结合在一道成为受精卵，这时患者需要使用一种特殊的方法让卵子受精，这就是单精子卵胞浆内注射术，也就是所谓的第二代试管婴儿技术。
第二代试管婴儿就是直接将男性的精子注射到卵细胞里边，区别于第一胎试管婴儿，在于第一代是将精子和卵子在体外受精之后培育胚胎植入子宫。应该要去所在省份有开设生殖医学专科的三甲医院做这项治疗。
第三代试管婴儿是在第一代和第二代的基础上，主要的作用是进行一些遗传性疾病的筛查和防止遗传给下一代，成功率跟第一代第二代是类似的，有60%-70%的成功率，但是不是说一定能够筛选到正常的胚胎。